那几张经典的冠状病毒图像,圆球表面伸出一圈刺突,看着像皇冠,很多人以为是用高级相机拍出来的。其实那是电子显微镜的成果,走的是完全另一套成像逻辑,跟光学显微镜不是一个路子。
光学显微镜受限于可见光波长,分辨率卡在几百纳米,病毒颗粒本身只有一百纳米左右,用光学显微镜看不清细节。电子显微镜用电子束代替光,电子的德布罗意波长极短,分辨率能到纳米甚至更细,正好覆盖病毒这个尺度。
扫描电镜和透射电镜是两条路线。扫描电镜靠电子束在样品表面扫描,收集二次电子,出来的是表面形貌的三维立体感图像,病毒球体和表面刺突的轮廓就是这么看到的。透射电镜是电子穿过超薄样品,看的是内部结构,负染之后病毒颗粒的轮廓和内部致密程度能看得更清楚。两种图经常配着用。
样品制备是关键,也最考验手艺。病毒样品要先灭活、固定,用戊二醛和锇酸把结构锁住;然后脱水,用梯度乙醇把水分替换掉;再干燥,临界点干燥或者冷冻干燥,避免表面张力把结构压塌;扫描电镜还要喷一层薄薄的金属增加导电性。负染则是把样品滴在铜网上,用磷钨酸这类重金属盐染色,背景变暗、颗粒显出轮廓。
操作这类样品要在生物安全三级实验室里做,活病毒不能直接上机,灭活和转移都有严格流程。设备本身也贵,场发射扫描电镜动辄几百万,透射电镜更贵,机时排得很紧,拍一张好图往往是几天样品制备加几个小时的调试。
还有个常见误解要说清楚:电镜原始图像是灰度的,网上那些蓝色、橙色的鲜艳版本,是后期用软件上色的假彩色,目的是让人更容易分辨结构,不代表真实颜色。看科普图的时候心里有个数,别把艺术化处理和原始数据混为一谈。
下一篇:没有了